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應(yīng)用:
用于從人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)或純化分離T細(xì)胞制備CAR-T細(xì)胞的培養(yǎng)或擴(kuò)增。
儲(chǔ)存:
2-8℃,避光保存。
使用說(shuō)明:從外周血PBMC擴(kuò)增活化CAR-T細(xì)胞:
Day 1-3
1.將新鮮分離或凍存復(fù)蘇的人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),按照2X106cells/mL的濃度,懸于 Nobimpex N108 或 N109 培養(yǎng)基中。按1ml/孔將細(xì)胞添加到24孔板中。
2.將 Human T-Activator CD3/CD28磁珠以與細(xì)胞1:1的比例(約12.5-18.75 ul beads)添加到細(xì)胞中。
3.添加終濃度300μL/mL的IL-2。將細(xì)胞放置于37℃、5%CO細(xì)胞培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
Day 4-5
4.重調(diào)整細(xì)胞濃度至0.5-1.0X106cells/mL,加入CAR轉(zhuǎn)染病毒(MOI:1-5),混勻,繼續(xù)培養(yǎng)。
Day 6-8
5.收集細(xì)胞進(jìn)行分析或后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
6.如需進(jìn)一步擴(kuò)大活化的T細(xì)胞數(shù)量,可以繼續(xù)用Human T-Activator CD3/CD28磁珠和重組人IL-2重
新活化細(xì)胞。重復(fù)步驟1-4。
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